为了得到一个PAGE所需的聚合完全的凝胶，聚丙烯酰胺凝胶需要在室温下凝聚69hr。最后，得到均质的含机械稳定和自由的单体或原子。凝胶的孔径很大，因此分子筛作用在电泳分离中最小化。基于上述原因，凝胶和活性分子之间的相互作用可以忽略。待分离的金属蛋白（如金属分子伴侣，蛋白酶感染性初级因子，金属运输蛋白，淀粉状蛋白，金属酶，金属肽等）不会分解成脱辅蛋白和金属辅助因子。孤立蛋白的生物活性结构（天然或3D构象）在QPNC-PAGE后不会发生构象变化。所以，金属蛋白和蛋白异构体在PAGE中被定量的分成高纯度的部分。QPNC与其它电泳技术如SDS-PAGE，2-DE，等速电泳和CN- PAGE等相比被称为“突破性的方法”。
1.3.3 实验方法
（1）储备液
1）200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.00，室温
2）200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH8.00，室温
3）40%丙烯酰胺/双丙烯酰胺2.67C，4℃（新鲜）
（2）电泳缓冲液
20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH10.00（除气），4℃
电泳槽上部：500ml电泳缓冲液
电泳槽下部：2000ml电泳缓冲液
（3）洗脱液
20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH8.00（除气），4℃
洗脱室：700ml洗脱缓冲液
（4）分离胶
丙烯酰胺4%T 体积40ml
成分：
4ml40%丙烯酰胺/双丙烯酰胺2.67C
4ml 200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.00
32 mL H2O
200 μL 10% APS
20 μL TEMED
APS和TEMED最后加入。轻轻搅拌烧瓶中的混合物，注意不能产生气泡。然后把溶液移入内径为28mm，长为40mm有刻度的玻璃柱中。加入3ml正丙醇。60分钟聚合后用电泳缓冲液冲洗凝胶，然后用4ml电泳缓冲液覆盖凝胶表面。在室温下凝集69小时。www.gytaobao.com
 

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